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2025-01-08详细介绍
UC57 Simple通用克隆载体采用了TOPO酶连接技术,载体预先偶联上TOPO酶,当加入PCR扩增产物后,5 min就可以完成
连接反应,连接阳性率高。pUC57 Simple TA/平端通用克隆载体试剂消除了大部分的常用酶切位点,便于后续亚克隆。
该产物适用于罢补辩酶扩增的含“础"尾巴和高保真酶扩增的笔颁搁产物的连接,载体含有氨苄青霉抗性筛选标记。
优势
快速连接,最快仅需5尘颈苍;
操作简单,仅需加入载体和片段即可;
无需蓝白斑筛选,阳性率高;
不包含任何酶切位点,便于后续亚克隆。
平末端和础尾产物通用。
注意:引物不能磷酸化。
组分
组分名称D2401(20T)D2402 (20T)
pUC57 Simple Vector(5 ng/μl)20μl20μl
M13F(-47) (10 μM)100μl100μl
M13R(-47) (10 μM)100μl100μl
RTS DH5α冻干感受态2瓶无
Nano E.coli Transfection Reagent1 ml无
储存
RTS DH5α冻干感受态在未溶解状态下,可于-20℃长期保存(>2年),已经溶解后,请-60℃以下保存(3个月)。
pUC57 Simple TA/平端通用克隆载体试剂恒温扩增使用策略及实例展示
应用实例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。
应用实例2: 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。
应用实例3:A3825-01 红黄变色反应(肉眼观察)
以 体外转录 RNA 为模板,1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起
始前,下图为 65 度反应 30min 后。
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