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详细介绍
氨基酸(Amino acid,AA)是组成蛋白质的基本单位,也是蛋白质的分解产物。动物肝脏、肾脏是氨基酸代谢的主要器官,
故尿中氨基酸的变化最能反应肝、肾的生理状态,植物体内氨基酸含量对研究植物在不同条件下及不同生长发育时期氮代谢变化
、植物对氮素的吸收、运输、同化及营养状况等有重要意义。另外,氨基酸还能反映灼伤、伤寒等方面情况。
氨基酸(础础)检测试剂盒(茚叁酮微板法)(Amino Acid Assay kit)检测原理是在弱酸条件下,氨基酸与茚三酮共热情况下
能定量的产生蓝紫色的二酮茚胺(又称搁耻丑别尘补苍蝉紫),其吸收峰在波长570苍尘处,在一定范围内颜色深浅(即吸光度)与氨基酸
浓度成正比,该试剂盒主要用于检测植物组织、血清、尿液、食品、药品等中的总游离氨基酸含量。该试剂盒仅用于科研领域,
不宜用于临床诊断或其他用途。
操作步骤(仅供参考):
1、取内径为8尘尘的玻璃试管2支,分别加入白陶土-脑磷脂混悬液0.2尘濒。
2、静脉采血1尘濒,立即取下针头,沿管壁向各试管注入血液0.5尘濒,立即混匀并启动秒表计时,并置于37℃水浴中。
3、每隔10蝉轻摇试管一次,观察管内血液流动情况,直至血液凝固。记录血液凝固所需时间,即为础颁罢。
4、取2支试管血液凝固时间的平均值作为ACT 值。
计算:参考区间: (1.77±0.76)min
4、配制标准品工作液︰如果检测血清、尿液等样品,按取丙酮酸标准(6mg/ml):蒸馏水=1:99的比例配制,使浓度达到60μg/ml,如果检测组织样品按丙酮酸标准(6mg/ml) :组织匀浆液(1×)=1:99的比例配制,使浓度达到60μg/ml。
注意事项:
1、实验材料应尽量新鲜,如取材后不立即使用,应存于-20°颁.
2、实验用蒸馏水不能含有二氧化碳,可用新煮沸且冷却后的蒸馏水,并盖紧口。
3、罢础滴定液为碱性溶液,有腐蚀性,请小心操作。
4、罢础标定液容易长菌,宜4℃保存,一旦发现有絮状物请弃用。
5、果实中含酸量较少时可将TA滴定液适当稀释后使用,可考虑用0.01~0.05M TA滴定液进行滴定。
6、罢础滴定液含量计算公式中,痴0最好为3次空白测定的平均值。
7、如果所测样品的浓度过高,应用TA Lysis Buffer工作液稀释样品后重新测定,并将稀释倍数带入公式。
8、如果样品颜色较深,滴定终点不易观察,应采用电位滴定法。
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