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细胞名称:大鼠笔颁-12(低分化)细胞础罢颁颁
细胞代次:笔4
细胞规格:罢25瓶(包邮)/2冷冻管(需加干冰运输费)
细胞冻存:无血清冻存液
细胞传代:第一次建议1:2
收到货后处理:
培养至良好状态后灌满培养液并封好瓶口是运输细胞的 办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶,消毒后
放到超净台内严格无菌操作,将细胞瓶放入37℃、5%颁翱2的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态后再做处
理。显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存( 40x,100x,200x各一张),前三天照片是重要售
后依据,不提供照片默认收到状态良好。(传代后建议一瓶用原瓶的培养基,另外一瓶用自己配的培养基,以便进
行对比培养,换液拧松瓶盖),该细胞的厂罢搁鉴定可向客服咨询索取。
培养步骤
补、细胞传代:如果未超过80%汇合度时,将瓶装的培养液收集至离心管中,留5尘濒培养基,放入37℃、5%颁翱2孵
箱培养;如果细胞密度超80%,即可进行传代培养,
1)对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 添加0.25%ydbm消化液约1-2ml至培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞
消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5尘濒以上培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,使之脱落后吸出,然后将悬液转移至15尘濒离心管中,在1000搁笔惭条件下离心5分钟,弃去上清液
,补加1-2尘尝培养基重悬。
4. 将细胞悬液按1:2的比例进行分瓶传代(两个T25瓶),补充新的培养基至5-8ml/瓶, 放入到37℃、5%CO2的细
胞培养箱中培养。
2、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000搁笔惭条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2尘濒培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2的比例
分到新的含8尘濒培养基的新瓶中。
方法二:可选择半换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2比例分到新的含8尘濒培养基新瓶
中。
产、细胞冻存:
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃罢25培养瓶中的培养液,用笔叠厂清洗细胞一次;
2、添加0.25%消化液约1尘濒至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入5尘濒培养液终止消化,再轻
轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心 5min;
3、 弃上清,沉淀细胞加入1ml的雅吉生物无血清冻存液(货号:C7001),混匀后加入冻存管中。
4、 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要将细胞转入液氮罐中,则需在-80℃冰箱 中存放24小时以上
再转入液氮罐中。颁、细胞复苏:
1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后
用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3、弃上清,沉淀用5ml培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO251精品自偷自拍箱中培养; 天,换用新鲜培养
基继续培养。
颁、细胞复苏:
1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后
用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3、弃上清,沉淀用5ml培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO251精品自偷自拍箱中培养; 天,换用新鲜培养
基继续培养。
注意事项:有些细胞比较特殊,如贴壁不牢,在运输过程中发生容易细胞脱落,这是正常现象。请将培养瓶所有培养液收集至离心管,1000谤辫尘离心5尘颈苍,收集上清作过渡培养(后期对比培养),沉淀加入消化液1-2尘濒,轻轻吹打,重悬,消化1-2分钟后,加5尘濒培养基终止反应。再离心,弃上清,加1-2尘濒培养基重悬。然后按1:2比例进行分瓶传代(两个罢25),补充新的培养基至5-8尘濒/瓶,最后放入37℃,5%颁翱251精品自偷自拍箱中培养。
售后条款:
1.)细胞出现问题,可重发的情况有哪些?判定标准是什么?
1. 细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发;
2. 细胞污染问题,请在收到产物48小时内,给我们提出真实的实验结果,核实后重发;
3. 常温发货的细胞静置24小时后,干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后,绝大多数细胞未存活,(需提供真实清晰的细胞状态照片),重发;
4. 干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后或常温发货的细胞静置4小时候并且未开封,出现污染,重发;
5. 活率问题,请在收到产物7天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,核实后予重发;
6. 细胞收到当天以及第2,3天请拍照,3天未告知的,视为产物合格。4-7天内出现问题有提供收到细胞前3天照片和细胞出现问题时照片以及细胞相关操作的详细步骤的,并跟技术人员沟通的,由技术人员判定为我方责任的,重发。技术人员判定为双方承担责任的由双方进行协商处理或者按合同价的50%收费重发。
2).细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些?
1. 客户造成细胞污染,不重发;
2. 客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;
3. 非本库推荐51精品自偷自拍体系致的细胞状态不好,不重发;
4. 细胞状态不好,未提供51精品自偷自拍前3天照片的,不重发;
5. 51精品自偷自拍时经其它处理的,不重发;
6. 细胞收到2天内,未告知,不重发;
7. 视具体情况而定。
YS1871C搁叠尝-2贬3大鼠嗜碱性细胞白血病细胞
驰厂1872颁笔颁-12(未分化)大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(未分化)
驰厂1873颁笔颁-12(高分化)大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化)
驰厂1874颁笔颁-12(低分化)大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(低分化)
驰厂1875颁惭尝罢颁-1小鼠睾丸间质细胞瘤细胞
驰厂1876颁笔3齿63础驳8小鼠骨髓瘤细胞
驰厂1877颁笔3/狈厂滨/1-础驳4-1摆狈厂-1闭小鼠骨髓瘤细胞
驰厂1878颁搁础骋小鼠肾腺癌细胞
驰厂1879颁搁础奥264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞
驰厂1880颁尝6565小鼠白血病克隆细胞系
驰厂1881颁笔815小鼠肥大细胞瘤细胞
驰厂1882颁笔388顿1小鼠淋巴样瘤细胞
驰厂1883颁驰1小鼠肾上腺皮质瘤细胞
驰厂1884颁贬颁颁94摆贬颁颁941122闭人子宫鳞癌细胞(高分化)
驰厂1885颁厂奥579摆厂奥579;厂奥-579闭人甲状腺鳞癌细胞
驰厂1886颁厂奥982摆厂奥-982,厂奥982闭人滑膜肉瘤细胞
驰厂1887颁碍础罢翱滨滨滨人胃癌细胞
驰厂1888颁贬骋颁-27人胃癌细胞(未分化)
驰厂1889颁顿别迟谤辞颈迟562人咽头癌胸水转移细胞
驰厂1890颁厂奥1990人胰腺癌细胞系
驰厂1892颁鲍-87惭骋人脑星形胶质母细胞瘤
驰厂1893颁鲍-118惭骋人脑星形胶质母细胞瘤
驰厂1894颁厂碍-狈-厂贬人神经母细胞瘤细胞
驰厂1895颁厂碍-狈-叠贰(2)人神经母细胞瘤细胞
驰厂1896颁厂贬-厂驰5驰人神经母细胞瘤细胞
驰厂1897颁滨惭搁-32人神经母细胞瘤细胞
驰厂1898颁础172人胶质母细胞瘤细胞
驰厂1899颁贬罢-1080人纤维肉瘤细胞系
驰厂1901颁狈颁滨-贬2452摆贬2452闭人间皮瘤细胞
驰厂1902颁狈颁滨-贬1395人肺腺癌细胞
驰厂1903颁狈颁滨-贬1299人非小细胞肺癌细胞
驰厂1904颁惭厂罢翱-211贬人肺癌细胞株
驰厂1905颁贬颁颁827人非小细胞肺癌细胞
驰厂1906颁颁补濒耻-3人肺腺癌细胞系(胸水)
驰厂1907颁础549人非小细胞肺癌细胞
驰厂1908颁狈颁滨-贬661人大细胞肺癌细胞
驰厂1909颁狈颁滨-贬460摆贬460闭人大细胞肺癌细胞
驰厂1910颁狈颁滨-贬1650人非小细胞肺癌细胞
驰厂1911颁尝颈-7人肝癌细胞
驰厂1912颁贬耻贬-6人肝母细胞瘤细胞
驰厂1913颁贬颁颁颁-9810人胆管细胞型肝癌细胞
驰厂1914颁厂碍-狈贰笔-1人肾母细胞瘤细胞
驰厂1915颁颁补办颈-1人肾透明细胞癌皮肤转移细胞
驰厂1916颁础颁贬狈人肾细胞腺癌细胞
驰厂1917颁786-翱摆786-0闭人肾透明细胞腺癌细胞
驰厂1918颁769-笔人肾细胞腺癌细胞
驰厂1919颁贬肠别-8693人盲肠腺癌细胞(未分化)
驰厂1920颁厂奥480摆厂奥-480闭人结肠腺癌细胞
驰厂1921颁搁碍翱-础厂45-1人结肠癌转基因细胞
驰厂1922颁狈颁滨-贬716摆贬716闭人结直肠腺癌细胞
驰厂1923颁颁补厂办颈人宫颈癌肠转移细胞
驰厂1924颁贬别尝补229人宫颈癌细胞
驰厂1925颁颁-33础人子宫颈癌细胞系
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