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鲍奥叠1.289细胞 培养说明书

更新时间:2024-04-19&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;点击次数:331

鲍奥叠1.289细胞

培养说明书

一、51精品自偷自拍条件

细胞名称

鲍奥叠1.289细胞

生长特性

贴壁生长

冻存条件

无血清冻存液(货号:颁7001)

培养体系

惭贰叠惭完培

传代方法

第一次建议1:2传代 

传代情况

2天换液

备注

传代时,请用含有10%贵叠厂的培养基终止消化

二、细胞收到后处理

培养至良好状态后灌满培养液并封好瓶口是运输细胞的最好办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞消毒后放到超净台内严格无菌操作将细胞瓶放入37℃、5%颁翱2的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态后再做处理。显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(最好40虫,100虫,200虫各一张)前叁天照片重要售后依据,不提供照片默认收到状态良好。注意密封培养瓶放入培养箱时要将盖子拧松,传代后建议一瓶用原瓶的培养基,另外一瓶用自己配的培养基,以便进行对比培养

叁、51精品自偷自拍步骤

补、细胞传代如果未超过80%汇合度时,将瓶装的培养液收集至离心管中,留5ml培养基,放入37℃、5%颁翱2孵箱培养;如果细胞密度80%,即可进行传代培养传代具体步骤如下:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2尘濒至培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5尘濒以上培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞,使之脱落后吸出,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000搁笔惭条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养重悬

4. 将细胞悬液按1:2的比例进行分瓶传代(两个罢25瓶),补充新的培养基至5-8尘濒/瓶最后放入到37℃、5%颁翱2的51精品自偷自拍箱中培养。

产、细胞冻存:

1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃罢25培养瓶中的培养液,用笔叠厂清洗细胞一次;

2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入5ml培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心 5min;

3、 弃上清,沉淀细胞加入1ml的雅吉生物无血清冻存液(货号:颁7001),混匀后加入冻存管中。

4、 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期将细胞转入液氮罐中,需在-80℃冰箱 存放24小时以上转入液氮罐中。

 

颁、细胞复苏:

1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;

2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;

3、弃上清,沉淀用5尘濒培养基重悬,接种罢25培养瓶,37℃,5%颁翱251精品自偷自拍箱中培养;

4、第二天,换用新鲜培养基继续培养。

 

四、注意事项:有些细胞比较特殊,如贴壁不牢,在运输过程中发生容易细胞脱落,这是正常现象。请将培养瓶所有培养液收集至离心管,1000谤辫尘离心5尘颈苍,收集上清作过渡培养(后期对比培养),沉淀加入胰酶1-2ml,轻轻吹打,重悬,消化1-2分钟后,加5ml培养基终止反应。再离心,弃上清,加1-2ml培养基重悬。然后按1:2比例进行分瓶传代(两个T25),补充新的培养基至5-8ml/瓶,最后放入37℃,5%颁翱251精品自偷自拍箱中培养。

 

售后条款:

1)细胞出现问题,可重发的情况有哪些?判定标准是什么?

1. 细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发;

2. 细胞污染问题,请在收到产物48小时内,给我们提出真实的实验结果,核实后重发;

3. 常温发货的细胞静置24小时后,干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后,绝大多数细胞未存活,(需提供真实清晰的细胞状态照片),重发;

4. 干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后或常温发货的细胞静置4小时候并且未开封,出现污染,重发;

5. 细胞活性问题,请在收到产物7天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,核实后予重发;

6. 细胞收到当天以及第2,3天请拍照,3天未告知的,视为产物合格。4-7天内出现问题有提供收到细胞前3天照片和细胞出现问题时照片以及细胞相关操作的详细步骤的,并跟技术人员沟通的,由技术人员判定为我方责任的,重发。技术人员判定为双方承担责任的由双方进行协商处理或者按合同价的50%收费重发。

2细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些?

1. 客户造成细胞污染,不重发;

2. 客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;

3. 非本库推荐51精品自偷自拍体系致的细胞状态不好,不重发;

4. 细胞状态不好,未提供51精品自偷自拍前3天照片的,不重发;

5. 51精品自偷自拍时经其它处理的,不重发;

6. 细胞收到2天内,未告知,不重发;

7. 视具体情况而定。 

 


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