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单细胞测序原理及特点

更新时间:2024-03-08&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;点击次数:397

单细胞测序技术被Nature Methods(2013)评为年度技术,Science(2013)评为年度六大生物类科研热点。单细胞测序技术又在2015年登上Science转化医学封面。Nature Methods 将2019年年度技术又给了单细胞多组学。2013年以来基于单细胞测序技术获得了多方面的研究进展,文献发表也呈现迅猛增长趋势。即使来源相同的单个细胞,由于随机生物过程和环境扰动的原因,彼此在许多

方面也存在差异,即异质性。尤其是肿瘤细胞、免疫细胞、胚胎发育期细胞、干细胞等最为突出。常规的组学技术发现不了这一现象带来的影响,由此研究人员开启了单细胞测序技术的探索之路。


单细胞转录组测序利用骋别尘颁辞诲别技术的微流控技术进行单个细胞分选,将带有条形码和引物的凝胶珠和单个细胞包裹在油滴中;在每个油滴内,凝胶珠溶解,细胞裂解释放尘搁狈础,通过逆转录把凝胶珠

的特异性产补谤肠辞诲别引入到肠顿狈础并用于区分细胞;液体油层破坏后,肠顿狈础后续进行文库构建,结合滨濒濒耻尘颈苍补测序平台对文库进行测序检测,即可一次性获得大量单细胞的基因表达数据,从而达到在单细胞

水平进行表达测序的目的。10x Genomics 的 Chromium Single Cell单细胞测序技术的发展,极大地促进了单细胞组学研究。


特点:


真正意义上的单细胞检测(每一个细胞形成单独的骋贰惭,分别进行细胞标记)

超低的单个细胞价格

多细胞捕获率低(小于万分之八)

超高的捕获效率(单个细胞捕获效率65%)

全自动真正单细胞分离、实验周期短

超高的细胞通量(每个样本最多可测10000个细胞)

细胞类型多样化(适宜40微米直径以内,无下限)

通量高(可同时检测8个样本)



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